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ELISA試劑盒標本及采集、貯運因素
更新時間:2017-07-11   點擊次數:977次

ELISA試劑盒進口大鼠標本及采集、貯運因素:
(1)ELISA試劑盒進口大鼠嚴重溶血,以HRP 為標記的ELISA 測定中,殘留在孔內的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性; 
(2)混有紅細胞的血清 易沉淀或附著在聚乙烯孔內不易洗凈;
(3)如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應; 
(4)標本凝固不全,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA 測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果; 
(5)采血試管洗滌不*、ELISA試劑盒進口大鼠反復使用易交叉污染; 
(6)塑料試管能吸附抗原物質 ,樣本久置在塑料管內會使樣本內抗原含量下降造成假陰性。 
ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)ELISA試劑盒進口大鼠定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

 

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